Fundada em 15 de agosto de 1537, Assunção se tornou a principal base de operação da colonização espanhola na região do Rio da Prata, e é uma das cidades mais antigas de toda a América do Sul.
A partir de Assunção partiram expedições coloniais que fundaram mais de 65 povoados na região, incluindo Santa Cruz de la Sierra (Bolívia), Corrientes e Santa Fe (Argentina) — e, em 1580, a segunda fundação de Buenos Aires, depois que a primeira tentativa de 1536 tinha sido abandonada.
Na prática, é uma ironia histórica real: a 'cidade-filha' Buenos Aires, fundada a partir de Assunção, cresceu para se tornar uma das maiores e mais visitadas capitais da América do Sul, enquanto a 'cidade-mãe' segue como uma capital bem menos conhecida pelo turista internacional.